微生物實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行微生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的場(chǎng)所，然而，實(shí)驗(yàn)室微生物的污染情況普遍存在，主要是細(xì)菌、真菌和支原體等，極易引發(fā)生物安全事件。為確保實(shí)驗(yàn)室安全和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與科學(xué)性，對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行消毒和滅菌至關(guān)重要。
一、消毒方法
1. 物理消毒方法：物理消毒方法主要包括紫外線消毒、高溫消毒、蒸汽消毒和過(guò)濾消毒等。紫外線消毒是通過(guò)紫外線照射破壞微生物的DNA結(jié)構(gòu)，使其失去繁殖能力；高溫消毒是通過(guò)提高溫度殺死微生物；蒸汽消毒是利用高溫高壓的蒸汽殺死微生物；過(guò)濾消毒則是通過(guò)過(guò)濾器將微生物截留在濾膜上，達(dá)到消毒目的。
2. 化學(xué)消毒方法：化學(xué)消毒方法是利用化學(xué)消毒劑殺死微生物。常用的化學(xué)消毒劑有酒精、碘伏、過(guò)氧化氫、甲醛等。使用化學(xué)消毒劑時(shí)應(yīng)注意消毒劑的濃度、作用時(shí)間和使用對(duì)象，以免產(chǎn)生副作用。
二、滅菌方法
1. 物理滅菌方法：主要包括干熱滅菌、濕熱滅菌、輻射滅菌、過(guò)濾滅菌和射線殺菌法等。干熱滅菌是通過(guò)高溫干燥環(huán)境殺死微生物；濕熱滅菌則是利用高溫高壓的蒸汽殺死微生物；輻射滅菌是通過(guò)核輻射破壞微生物的DNA結(jié)構(gòu)，使其失去繁殖能力；過(guò)濾滅菌與過(guò)濾消毒原理相同，將微生物截留在濾膜上。
1）.干熱滅菌法
是利用恒溫干燥箱內(nèi)120℃-150℃的高熱，并保持90-120分鐘，殺死細(xì)菌和芽孢，達(dá)到滅菌目的的一種方法。
主要適用于不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥，易于貯存。酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬于干熱滅菌的方法之一，在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)工作時(shí)，常須利用工作臺(tái)面上的酒精燈火焰對(duì)金屬器具及玻璃器皿口緣進(jìn)行補(bǔ)充滅菌。
2）.濕熱滅菌法
壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前蕞常見(jiàn)的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的穿透力，使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而使微生物死亡。
適合于布類工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養(yǎng)液的滅菌。高壓蒸汽滅菌器的蒸汽壓力一般調(diào)整為1.0-1.1 kg/cm2，維持20-30min即可達(dá)到滅菌效果。
3）.過(guò)濾除菌法
是將液體或氣體通過(guò)有微孔的濾膜過(guò)濾，使大于濾膜孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留，從而達(dá)到除菌的方法。過(guò)濾除菌法大多用于遇熱易發(fā)生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養(yǎng)液等。
目前，常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過(guò)濾除菌，或用玻璃細(xì)菌濾器、濾球負(fù)壓過(guò)濾除菌。濾膜孔徑應(yīng)在0.22-0.45μm范圍內(nèi)或用更小的細(xì)菌濾膜，溶液通過(guò)濾膜后，細(xì)菌和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻，并利用濾膜的吸附作用，阻制小于濾膜孔徑的細(xì)菌透過(guò)。
4）.射線滅菌法
利用紫外線燈進(jìn)行照射滅菌的方法。紫外線是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物。紫外線的作用機(jī)制是通過(guò)對(duì)微生物的核酸及蛋白質(zhì)等的破壞作用而使其滅活。
適合于實(shí)驗(yàn)室空氣、地面、操作臺(tái)面滅菌。滅菌時(shí)間為30min。用紫外線殺菌時(shí)應(yīng)注意，不能邊照射邊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，因?yàn)樽贤饩€不僅對(duì)人體皮膚有傷害，而且對(duì)培養(yǎng)物及一些試劑等也會(huì)產(chǎn)生不良影響。
2、化學(xué)滅菌方法：
化學(xué)滅菌劑分為氣體滅菌劑和液體滅菌劑。氣體滅菌劑主要包括C2H4O、甲醛、過(guò)氧化氫等；液體滅菌劑主要包括醇類、酚類和酸類等。使用化學(xué)滅菌劑時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的滅菌劑，并確保其在有效濃度下作用足夠時(shí)間。
化學(xué)消毒劑消毒法
化學(xué)消毒劑使用范圍比較廣泛，可用于那些不能利用物理方法進(jìn)行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實(shí)驗(yàn)器皿等。常用的化學(xué)消毒劑包括甲醛、KMnO4、70%-75%乙醇、C2H4O3、新潔爾滅、C2H4O、以及過(guò)氧化氫等。但是普通的化學(xué)消毒劑有殘留和腐蝕性，在使用時(shí)應(yīng)注意安全，特別是用在皮膚或?qū)嶒?yàn)材料上的消毒劑，須選用合適的藥劑種類、濃度和處理時(shí)間，才能達(dá)到安全和滅菌的目的。而目前*食品級(jí)過(guò)氧化氫消毒劑具有安全綠色無(wú)殘留的特點(diǎn)，可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)材料的滅菌，同時(shí)搭配過(guò)氧化氫干霧滅菌器可以對(duì)無(wú)菌室和培養(yǎng)室的空氣消毒。
微生物實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行微生物研究的場(chǎng)所，對(duì)環(huán)境要求很高，應(yīng)該保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的環(huán)境潔凈安全，嚴(yán)格的消毒滅菌工作非常重要，影響著實(shí)驗(yàn)室順利研究實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，同時(shí)嚴(yán)格的消毒滅菌也為實(shí)驗(yàn)室工作人員提供一個(gè)清潔而良好的工作環(huán)境。
三、實(shí)驗(yàn)室消毒和滅菌注意事項(xiàng)
1. 選擇合適的消毒劑和滅菌劑：根據(jù)實(shí)驗(yàn)物品的材質(zhì)、結(jié)構(gòu)和微生物種類選擇合適的消毒劑和滅菌劑，確保其在有效濃度和作用時(shí)間下達(dá)到消毒或滅菌效果。
2. 嚴(yán)格操作流程：在進(jìn)行消毒和滅菌操作時(shí)，應(yīng)遵循相關(guān)操作規(guī)程，確保實(shí)驗(yàn)安全。
3. 個(gè)人防護(hù)：實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)穿戴防護(hù)服、口罩和手套等個(gè)人防護(hù)用品，防止感染風(fēng)險(xiǎn)。
4. 監(jiān)測(cè)消毒和滅菌效果：通過(guò)定期監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)物品的微生物指標(biāo)，評(píng)估消毒和滅菌效果，確保實(shí)驗(yàn)室安全。
5. 定期維護(hù)和更換消毒滅菌設(shè)備：消毒和滅菌設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng)，確保其正常運(yùn)行。同時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換過(guò)期或破損的消毒劑和滅菌劑，以免影響消毒滅菌效果。
總之，微生物實(shí)驗(yàn)室消毒和滅菌方法多種多樣，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和實(shí)際情況選擇合適的消毒和滅菌方法。同時(shí)，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)和監(jiān)測(cè)，確保實(shí)驗(yàn)室安全。微生物實(shí)驗(yàn)室消毒和滅菌工作得到了越來(lái)越多的重視，相關(guān)技術(shù)和管理措施不斷完善，為微生物學(xué)研究和發(fā)展創(chuàng)造了良好的條件。
可可.jpg)
